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ANEXO C
EQUIPAMIENTO E INSTRUCCIONES PARA LA TOMA DE
MUESTRAS EN LA INVESTIGACIÓN DE ETA
CONTENIDO:
1. Equipos y útiles para la toma de
muestras.
2. Recolección,
conservación, envase y envío de muestras de
alimentos.
3. Instrucciones para la toma de muestras
de especímenes clínicos de manipuladores para
exámenes bacteriológicos.
4. Instrucciones generales para la
recolección de muestras fecales.
1. EQUIPOS Y ÚTILES PARA LA TOMA DE
MUESTRAS
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TIPO DE EQUIPO
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DESCRIPCIÓN
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Envases para muestras esterilizadas
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Bolsas de plástico (desechables o tipo Whirl-pak),
frascos de boca ancha (0.3 a 1.5 litros de capacidad) con tapas de
rosca, botellas para muestra de agua (las botellas para agua
clorada deben contener suficiente tiosulfato de sodio para asegurar
una concentración de 100 mg de ese compuesto por cada litro
de muestra), papel de estaño o de envolver grueso
(envuelto), recipientes de metal.
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Implementos esterilizados y envueltos para recolección de
muestras
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Cucharas, cucharones, bajalenguas, cuchillos de carnicero,
fórceps, pinzas, espátulas, trozos de taladro, tubos
metálicos (1.25 a 2.5 cm de diámetro: 30 a 60 cm de
largo) pipetas, tijeras, hisopos, hisopos de Moore (almohadillas
compactas de gasas, hechas con trozos de 120 por 15cm, atadas en el
centro con un hilo o alambre largo y fuerte, para muestras tomadas
de alcantarillas, drenajes, arroyo, tuberías, etc).
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Equipos para recolección de muestras
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Envases de cartón (con tapa) para muestras de heces,
frascos que contienen un preservativo y una solución para
transporte, recipientes y cartones protectores para muestras de
heces, hisopos esterilizados, equipos para hisopados rectales,
almohadillas de gasa esterilizadas de 10 x 10 cm, tubos de medios
de transporte.
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Dispositivos de registro de temperatura
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Termómetro tipo bayoneta (para carne) con límites
que incluyan de -17.8 a 104o C (-0,04ºF a
219,2ºF) de, por lo menos, 13 cm de largo (preferiblemente 20
cm) en envase protector, termómetro con bulbo (límite
-17.8 a 104oC)(-0,04ºF a 219,2ºF) en envase
protector, pluma marcadora de punta fina de fieltro, rollo de cinta
adhesiva, rótulos, trocitos de cartón a prueba de
agua (impermeables) con ojalillos y atados con alambre, linterna,
taladro eléctrico, fósforos, agua peptonada al 0.1%,
agua destilada con buffer (5ml en tubos de tapa a rosca), gradilla
para tubos de ensayo, caja aislada, formularios para
investigadores.
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Equipo de apoyo
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Marcador de punta fina, rollo de cinta adhesiva, etiquetas,
tarjetas a prueba de agua con perforación y alambre,
linterna, taladro eléctrico, fósforos, agua peptonada
o destilada bufferada (5 ml en tubos de tapa de rosca), gradilla,
envase aislado, medidor de pH, hidrómetro, protocolos de
investigación.
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Agentes esterilizadores
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Alcohol etílico (95%), antorcha de propano.
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Refrigerantes
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Hielo envasado, refrigerante en bolsas de plástico,
líquido en latas, bolsas o jarros de plástico o goma
que pueden llenarse de agua y congelarse, bolsas de plástico
muy resistentes para hielo.
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Ropas
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Guardapolvos blancos para laboratorio, sombreros de papel,
guantes de plástico desechables, botas de plástico
desechables (opcionales).
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Por lo menos, 15 bolsas de plástico o frascos de boca
ancha esterilizadas, 15 cucharas esterilizadas, 8 envases para
recolección de muestras o dispositivos similares y una
unidad de cada kit de equipo y de esterilización, todo ello
reunido en un kit que se guarda en el organismo responsable de la
investigación de enfermedades transmitidas por alimentos.
Para que dicho kit esté siempre en condiciones de usarse
inmediatamente, se requiere su periódica
reesterilización o el reemplazo de útiles, medios o
medios de transporte esterilizados.
2. RECOLECCIÓN, CONSERVACIÓN,
ENVASE Y ENVÍO DE MUESTRAS DE ALIMENTOS
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MUESTRAS
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MÉTODOS DE RECOLECCIÓN Y
CONSERVACIÓN
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MÉTODOS DE ENVASE Y ENVÍO
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Alimentos sólidos o mezcla de dos alimentos
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Cortar o separar porciones de alimentos con un cuchillo
esterilizado u otro implemento, de ser necesario. Recoger
asépticamente, por lo menos, 200 g de muestra con un
implemento esterilizado y transferir a una bolsa de plástico
esterilizada o a un frasco de vidrio de boca ancha. Tomar
diferentes muestras de arriba, del centro y de otros lugares,
según se considere necesario. Refrigerar la muestra.
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Rotular. Colocar refrigerante alrededor del envase con la
muestra. No congelar ni usar hielo seco. Llevar la muestra al
laboratorio o enviarla por el medio más rápido
posible.
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Alimentos líquidos o bebidas
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Revolver o agitar. Tomar la muestra de una de las siguientes
formas:
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1. Echar, con un implemento esterilizado, por lo menos, 200 ml
en un envase esterilizado. Refrigerar la muestra.
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Igual al anterior.
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2. Colocar un tubo largo esterilizado en el líquido y
cubrir la abertura superior con el dedo o la palma. Transferir el
liquido a un jarro o a una bolsa esterilizada. Refrigerar la
muestra.
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Igual al anterior.
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3. Sumergir un hisopo de Moore en el recipiente con el alimento
líquido o insertarlo en una tubería para que el
líquido circule a través de ella. Conservar en
posición durante varias horas si es posible. Transferir el
hisopo a un frasco que contenga caldo de enriquecimiento.
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Llevar la muestra al laboratorio lo más pronto posible,
generalmente la refrigeración no es necesaria.
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4. Si el líquido no es viscoso, pasar 1 ó 2 litros
por un filtro de membrana. Transferir asépticamente la
almohadilla del filtro a un frasco de caldo de enriquecimiento.
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Igual al anterior.
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Alimentos congelados
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Usar uno de los siguientes procedimientos:
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Mantener congelado. Usar hielo seco si es necesario. Tomar o
enviar en envase aislado.
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1. Enviar o llevar pequeños volúmenes congelados
al laboratorio, sin descongelar ni abrir.
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2. Perforar con taladro esterilizado de diámetro grande,
desde la parte superior del envase, diagonalmente por el centro,
hasta la parte inferior del lado opuesto. Repetir al otro lado
hasta recoger, por lo menos, 200g.
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3. Picar el material congelado con martillo y cincel
esterilizado y recoger las astillas con un implemento esterilizado,
transferir, por lo menos, 200g a un envase estéril. Mantener
congelado. Usar hielo seco si es necesario. Tomar o enviar envase
aislado.
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Carnes o aves crudas
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Hacer el muestreo de una de las formas siguientes:
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Igual que para alimentos sólidos o líquidos; si
están en caldo de enriquecimiento, llevar al laboratorio lo
más pronto posible.
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1. Con un implemento estéril o guante plástico
estéril, colocar la carcasa del ave o un gran trozo de carne
en una bolsa grande estéril de plástico.
Añadir 100 a 300 ml de caldo de enriquecimiento. Remover la
muestra y cerrar la bolsa.
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2. Pasar una esponja estéril sobre un área grande
de carcasa o corte de carne. Poner el hisopo en un frasco con caldo
de enriquecimiento.
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3. Humedecer un hisopo con agua destilada bufferada o con agua
peptonada al 0.1%. Tomar con el hisopo una parte grande de carcasa
o corte de carne. Colocarlo en el caldo de enriquecimiento para el
patógeno buscado.
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4. Con un guante de plástico estéril limpiar la
carcasa con cuadrados de gasa esterilizada. Poner la gasa en un
frasco de caldo de enriquecimiento.
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5. Cortar asépticamente una porción de carne o
piel de partes diferentes de la carcasa o el corte de carne o
remover una porción de carcasa. Poner, por lo menos, 200g de
muestra en una bolsa plástica o frasco de vidrio
esterilizado. Refrigerar.
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6. Poner la carcasa de ave, parte de ave o gran porción
de carne en una bolsa de plástico grande, esterilizada.
Añadir 100ml de caldo de enriquecimiento y agitar. Quitar la
muestra y cerrar la bolsa.
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Alimentos deshidratados
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Insertar un tubo hueco esterilizado, desde la parte superior de
un lado del envase, diagonalmente por el centro, hasta la parte
inferior del lado opuesto. Sostener la parte superior y transferir
a un envase esterilizado. Repetir del lado opuesto hasta recoger,
por lo menos, 200g. Un método alternativo consiste en
recoger material con una cuchara, una espátula, un
bajalengua o un implemento similar, siempre esterilizado.
Transferir el material a un envase estéril.
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Conservar en envase herméticamente sellado y resistente a
la humedad. Llevar o enviar al laboratorio.
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Material de raspado, filtros de aire, barreduras, polvo,
desechos, etc.
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Cortar o recoger, por lo menos, 200g de material con un
bajalengua esterilizado, espátula, cuchara o pinzas y
colocar en bolsas de plástico o frascos de boca ancha, todo
ello esterilizado.
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Igual al anterior, según el material.
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Hisopados ambientales o de la superficie de los equipos
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Humedecer el hisopo con agua peptonada esterilizada al 0.1% con
agua destilada bufferada y pasar por las superficies de contacto de
los equipos o las superficies ambientales. Colocar el hisopo en
caldo de enriquecimiento.
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Empacar, rotular y enviar como hisopado fecal.
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Aire
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Tocar la placa o el liquido con un dispositivo para muestreo de
aire, o dejar que se asiente sobre el caldo o en las placas.
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Cerrar con cinta aisladora, rotular o llevar al laboratorio.
Refrigerar las muestras liquidas.
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Agua
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Tomar muestras con antecedentes, incluyendo agua en botellas, en
refrigeradores, cubitos de hielo y tanques. Tomar muestras de agua
del grifo después de dejarla correr durante 10 segundos.
Tomar muestras de agua de fuente u origen, después de
dejarla correr durante 5 minutos. Dejar el frasco estéril
bajo el chorro de agua y llenar hasta 2.5cm de la tapa. Recoger de
1 a 5 litros. Pueden usarse alternativamente filtros de membrana.
Los hisopos de Moore pueden utilizarse para tomar muestras de agua
en arroyos o cañerías, mantenerlos en posición
hasta 48 horas y luego transferirlos a frascos con caldo de
enriquecimiento.
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Cerrar con cinta aisladora; rotular. Empacar con material
absorbente. Poner en una caja y llevar o enviar al laboratorio.
Generalmente no se necesita refrigeración.
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3. INSTRUCCIONES PARA LA TOMA DE MUESTRAS DE
ESPECÍMENES CLÍNICOS DE MANIPULADORES PARA
EXÁMENES BACTERIOLÓGICOS
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TIPO DE ESPÉCIMEN
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TÉCNICA DE RECOLECCIÓN
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CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE
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TIPO DE PRUEBA
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Sub-ungueal
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1. Humedecer un hisopo con solución salina estéril
o caldo
Muller Hinton.
2. Recoger el material e introducirlo inmediatamente en el medio
de transporte.
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Llevar inmediatamente al laboratorio a temperatura ambiente. Si
no es posible, dejar así durante 24 horas, como
máximo. Después colocar un hisopo con hielo.
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Investigación de:
E.coli fecal
Salmonella
Shigela
Estafilococos
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Lesiones de la piel:
Furúnculos,
Abscesos,
secrecionales en general,
(principal
mente de brazos, manos, dedos, cuello y cara)
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1. Limpiar la piel con solución fisiológica o con
desinfectante débil, para evitar la contaminación con
gérmenes saprófitas.
2. Presionar la lesión con ayuda de gasas
estériles y coger la muestra con el hisopo estéril
procurando coger la mayor cantidad posible de secreción.
3. Si la lesión es cerrada, desinfectar la piel y
pensionar con jeringa estéril.
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Si no es posible el envío inmediato al laboratorio,
colocar el hisopo o el material cogido con jeringa dentro de un
tubo estéril o en el medio de transporte.
En caso de que no sea posible el envío dentro de 24
horas, colocar en un depósito con hielo, hasta la entrega al
laboratorio.
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Investigación de:
Estafilococos
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Orofaringe y fosas nasales
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Recoger el material con un hisopo estéril e introducirlo
inmediatamente en el medio de transporte.
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Enviar inmediatamente al laboratorio. Si no es posible el
envío dentro de 24 horas, colocar en un depósito con
hielo hasta la entrega.
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Investigación de: Estafilococos
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Vómitos
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El paciente podrá vomitar directamente en un
depósito estéril o en una bolsa plástica.
Se puede recoger de un depósito o receptáculo
limpio mediante una cuchara o espátula y colocarlo en envase
estéril.
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Mantener refrigerado hasta su análisis pero NO
CONGELAR.
Transportar rápidamente al laboratorio
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Agentes patógenos
Toxinas
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Orina
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Limpiar el área alrededor del orificio uretral con yodo
al 4%. Colectar hasta 30 ml en un frasco estéril y
taparlo.
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Mantener refrigerado hasta su análisis pero NO
CONGELAR.
Transportar rápidamente al laboratorio
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Agentes patógenos
Tóxicos químicos y naturales
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Sangre
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Tomar la sangre de la vena media anticubital. Tomar 15 ml en el
caso de adultos, 3 ml en el caso de niños. Centrifugar la
sangre, colocar el suero en un vial pequeño y guardarlo a
–18°C. Otra forma es dejar la sangre en reposo y extraer
el suero con una pipeta y colocarla en un vial.
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Refrigerar la sangre. Nunca congelarla porque se lisan los
hematíes y alteran la muestra.
El suero puede congelarse
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Anticuerpos, agentes y toxinas
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4. INSTRUCCIONES GENERALES PARA LA
RECOLECCIÓN DE MUESTRAS FECALES
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RECOLECCIÓN CONSERVACIÓN
TRANSPORTE
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TIPO DE AGENTE
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VIRUS
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BACTERIAS
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PARÁSITOS
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Cuándo recolectar
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Dentro de las 48-72 horas siguientes al inicio de la
enfermedad.
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Durante períodos de diarrea activa (preferiblemente lo
más pronto posible luego del inicio de la enfermedad).
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En cualquier momento luego del brote de la enfermedad
(preferiblemente lo más pronto posible luego del brote de la
enfermedad).
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Cuánto recolectar
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La mayor cantidad posible de muestras de heces de cada una de
las 10 personas enfermas (por lo menos, 10cc por cada persona);
también deben tomarse muestras de 10 controles.
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Dos hisopos rectales o hisopos de heces frescas de cada una de
las 10 personas enfermas; también pueden presentarse
muestras de 10 controles.
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Una muestra de heces fresca de cada una de las 10 personas
enfermas; también pueden presentarse muestras de 10
controles.
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Método de recolección
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Colocar muestras de heces frescas (preferentemente
líquidas), que no se hayan mezclado con orina, en envases
limpios y secos; (por ejemplo, en envases para recoger muestras de
orina).
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Para preparar los hisopos rectales. Primero, mojar cada uno de
los dos hisopos en medio de Cary-Blair, luego insertar en secuencia
1-1,5 pulgadas en el recto y hacer rotar el hisopo lentamente.
Colocar ambos hisopos en el mismo tubo que contiene el Cary-Blair.
Romper las porciones superiores de los palillos de los hisopos y
bote.
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Recoger una muestra de heces que no esté mezclada con
orina en un recipiente limpio. Colocar una porción de cada
muestra de heces en una solución preservativa de formalina y
alcohol polivinílico a una proporción de 1 parte de
heces por 3 partes de preservativo. Mezclar bien.
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Almacenamiento del espécimen después de su
recolección
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Refrigerar de inmediato a 4o C. NO CONGELAR si se
prevé el uso de un microscopio electrónico.
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Refrigerar inmediatamente a 4o C si las pruebas van a
hacerse dentro de las 48 horas siguientes a la recolección
de muestras; de lo contrario congelar las muestras a
-70o C.
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Guardar a temperatura ambiente o refrigerar a 4o C.
NO CONGELAR.
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Transporte
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Mantener las muestras refrigeradas. Utilizando un recipiente en
material aislante, colocar las muestras en bolsas selladas sobre
hielo o sobre paquetes refrigerantes. Enviar por correo urgente. NO
CONGELAR.
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Refrigerar tal como se ha indicado hacer con especímenes
virales. En el caso de muestras congeladas, colocar las muestras
selladas en bolsas sobre hielo seco. Despachar en una caja de
material aislante por el correo nocturno.
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Refrigerar tal como se ha indicado hacer con especímenes
virales. Para las muestras a temperatura ambiente despachar en
recipientes a prueba de agua. NO CONGELAR.
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Identifique cada envase que contenga una muestra con un marcador
a prueba de agua. Coloque las muestras en envases sellados y a
prueba de agua (por ejemplo, bolsas plásticas). Prepare un
lote y envíe por correo nocturno, previsto para llegar a su
destino en día laboral durante las horas de oficina.
INPPAZ - OPS -
OMS
© 2001
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